آلکالین فسفاتاز تقریباً در بیشتر بافتها یافت میشود ولی این آنزیم عمدتاً در استخوان، کبد یا روده کوچک وجود دارد. اندازه گیرى این آنزیم در بیماریهاى کبدى، صفراوى و استخوان داراى اهمیت است، مخصوصاً در بیماری هاى کبدى همراه با انسداد. افزایش پاتولوژیک فعالیت آن نشانگر بیماریها ى کبد (هپاتیت و سیروز)، استخوان و تومورهاى بدخیم است و مقدار آن در بعضی از بیماریهاى غدد تیروئید و روده ها و نیز عفونتهاى باکتریال نیز بالا می رود.
روش کیت سنجش آلکالین فسفاتاز: DGKC/Kinetic
اصول آزمایش:
طراحی DEA این کیت با استفاده از سوبستراي پارانیترو فنیل فسفات” در بافر قلیایی
موجود در نمونه ، این سوبسترا را هیدرولیز کرده و تبدیل به PLA شده است. آنزیم
ماده زرد رنگ پارانیتر فنیل” می کند. با اندازه گیري تغییرات جذب در واحد زمان در طول موج
405 – 410 ” نانومتر امکان محاسبه فعالیت آنزیم فراهم می شود.
نمونه مورد آزمایش:
EDTA سرم تازه بدون همولیز یا پلاسماى هپارینه است
مواد ضد انعقاد: اگزالات، فلوراید یا در سرم در ALP باعث مهار آنزیم میشوند و نباید مورد استفاده قرار بگیرند. پایدارى در 2 درجه سانتیگراد بمدت 1 هفته را دارد و در دماى 20 – درجه سانتیگراد براى مدت 8-2 ماه را دارا می باشد
آماده سازي محصول:
R معرفهاى 1 :(Substrate Start) تهیه محلول براى حالت دو محلول جدا از هم
Substrate Start بصورتی که جداگانه مورد استفاده قرار گیرند R و 2 آماده مصرف
میباشند.
Sample Start تهیه محلول کار آماده براى تک محلول : بسته به نیاز
R را با یک قسمت از معرف 2 R 4 قسمت از معرف 1 مخلوط نمایید، براى مثال
به آرامی مخلوط کنید. پایدارى R را با 2 میلیلیتر معرف 2 R 8 میلیلیتر معرف 1
2 درجه سانتیگراد میباشد. محلول را دور از نور – این محلول کار 5 روز در دماى 8
نگهدارى نموده و از آلوده شدن آن خوددارى شود.
مواد و وسایل مورد نیاز:
1- کووت مناسب با قطر یک سانتیمتر
-2 اسپکتروفتومتر یا کالریمتر با قابلیت اندازه گیرى در دامنه 405 نانومتر
0 درجه سانتیگراد ) / -3 بن مارى 37 درجه سانتیگراد ( 1
-4 سمپلر دقیق و کالیبره شده
-5 نوك سمپلر نو و تمیز زرد و آبی
-6 دستگاههاى عمومی آزمایشگاه
-7 استاندارد یا کالیبراتور معتبر ( میتوان از مولتی کالیبراتور عرضه شده توسط شرکت
پارس پیوند پویش استفاده نمود.)
نگهداري و پایداري:
2 درجه سانتیگراد تا تاریخ انقضاء مندرج برروى ویالها پایدار – • معرف ها در دماى 8
می باشند، مشروط بر اینکه درب ویالها بسته و آلوده نگردند. پایدارى معرف کار
بروى اتوآنالایزرهاى مجهز به سیستم سردکننده یا یخچال 15 روز و یا 10 روز در
15 درجه سانتیگراد است. – دماى اتاق 25
• از یخ زدگی معرفها پرهیز شود .
را دور از نور نگهدارى نمایید .
( R2) • معرف 2
• کدورت یا اجزاء خارجی در این معرف باعث افزایش جذب نورى بلانک بیشتر از
1/3 در طول موج 405 نانومتر میگردند که از علائم تخریب معرف میباشد.
روش انجام آزمایش:
پارامترها: دما: 37 درجه سانتیگراد / طول موج: 405 نانومتر / کووت: یک سانت /
خوانش: مقابل هوا یا آب مقطر / نوع واکنش: افزایشی
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.