آموزش فلوسایتومتری قسمت سوم

سیتومتری
آموزش فلوسایتومتری قسمت سوم (سیتومتری ): هر فلوروکروم دارای طیف وسیعی از فلورسانس است. هنگامی که بیش از یک فلوئورکروم استفاده می شود ، همپوشانی بین فلوروکروم ها می تواند رخ دهد.

به این وضعیت همپوشانی طیف گفته می شود. باید بر این وضعیت غلبه کرد. به عنوان مثال ، طیف انتشار برای FITC و PE بدین صورت است که نوری که توسط فلورسئین منتشر می شود ، با همان طول موج عبور از فیلتر مورد استفاده برای PE همپوشانی دارد.

این همپوشانی طیفی با حذف بخشی از سیگنال FITC از سیگنال های PE یا بالعکس اصلاح می شود. این فرآیند جبران رنگ نامیده می شود ، که یک فلوروکروم را به عنوان درصد برای اندازه گیری خود محاسبه می کند.

در فلوسایتومتری جبران فرآیند ریاضی است که توسط آن همپوشانی طیفی داده های سیتومتریک جریان چند پارامتر اصلاح می شود.

از آنجا که فلوروکروم ها می توانند در فلوسایتومتری  طیف گسترده ای داشته باشند ، می توانند با هم همپوشانی داشته باشند و باعث ایجاد نتیجه نامطلوب سردرگمی در هنگام تجزیه و تحلیل داده ها شوند.

این همپوشانی ، که به عنوان سر ریز شناخته می شود و در ضریب سرریز کمی تعیین می شود.

معمولاً توسط آشکارسازهای فلوروکروم خاص اندازه گیری یک قله قابل توجه در طول موج از فلوروکروم متفاوت ایجاد می شود. برای انجام این تصحیح اغلب از جبر خطی استفاده می شود.

به طور کلی ، هنگامی که نمودارهای یک یا چند پارامتر نمایش داده می شود ، برای نشان دادن این است که پارامترهای دیگر به توزیع نشان داده شده کمک نمی کنند.

به خصوص هنگام استفاده از پارامترهایی که بیش از دو برابر هستند ، این مشکل شدیدتر است.

در حال حاضر ، هیچ ابزاری برای نمایش کارآمد پارامترهای چند بعدی کشف نشده است.

در این قسمت به ادامه قسمت دوم آموزش فلوسایتومتری خواهیم پرداخت